第一步是 “激發(fā)",儀器會發(fā)出特定波長的光(激發(fā)光),照射到待檢測的樣品上。
第二步是 “發(fā)光與檢測",樣品中的目標物質(zhì)吸收激發(fā)光能量后,會釋放出波長更長的光(熒光),儀器的檢測器會捕捉這種熒光的強度。
最后通過熒光強度和已知濃度的標準樣品對比,就能算出未知樣品中目標物質(zhì)的含量,就像用 “標準尺" 量出未知的 “長度" 一樣。
檢測物質(zhì)含量:比如檢測飲用水里的重金屬(如汞、鎘)、食品中的維生素(如維生素 B2),或者生物樣本里的蛋白質(zhì)、核酸,通過熒光強度直接算出具體含量。
分析物質(zhì)特性:判斷物質(zhì)的純度,比如某些藥品里的雜質(zhì)會發(fā)出特定熒光,通過檢測是否有多余熒光,就能知道藥品純不純;還能研究物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu),比如判斷有機化合物的官能團。
環(huán)保與科研:在環(huán)保領(lǐng)域,檢測廢水里的污染物(如農(nóng)藥殘留、多環(huán)芳烴);在生物科研中,觀察細胞內(nèi)的熒光標記物質(zhì),研究細胞活動。
樣品要處理好:樣品不能有渾濁、沉淀,否則會擋住光線,導(dǎo)致熒光強度不準;如果樣品濃度太高,會出現(xiàn) “熒光猝滅"(濃度越高,熒光反而變?nèi)酰枰崆跋♂尩胶线m濃度。
控制實驗環(huán)境:溫度會影響熒光強度,比如溫度升高,很多物質(zhì)的熒光會變?nèi)酰员M量在恒溫環(huán)境下檢測;另外,避免強光直射儀器,防止外界光線干擾檢測結(jié)果。
定期校準儀器:就像秤要定期調(diào)準一樣,熒光光度計也需要用標準樣品校準,比如每次檢測前用已知濃度的熒光標準液測試,確保儀器讀數(shù)準確,不然測出來的結(jié)果可能 “差之千里"。





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